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你还在为细胞计数过程中的碎片和杂质干扰而烦恼吗?

点击次数:85 发布时间:2021-04-07
单细胞测序技术(scs)是指在单个细胞水平上对其携带的遗传信息进行测序,获得某种细胞类型的基因序列等信息并进行整合分析,目前广泛应用于新物种鉴定、病原筛查、病原进化、发育生物学、神经科学、肿瘤异质性研究以及循环肿瘤细胞等。该技术在2013年荣膺《自然-方法》年度技术。目前主要的方法为10x Genomics。
单细胞测序技术实例
1. 多重退火和成环循环扩增技术主要研发人:哈佛大学终身教授、美国科学院院士谢晓亮教授技术看点:降低PCR扩增偏倚,使得单细胞中93%的基因组能够被测序。这种方法使得检测单细胞中较小的DNA序列变异变得更容易,因此能够发现个别细胞之间的遗传差异。2. 基于芯片实验室技术的单细胞测序主要研发人:斯坦福大学Stephen Quake技术看点:基于lap on a chip开发3. 基于MDA的单细胞测序主要研发人:深圳华大基因研究院技术看点:将多重置换扩增(MDA)和测序技术相结合4. Strand-seq主要研发人:加拿大英属哥伦比亚大学Peter Lansdorp技术看点:能捕捉DNA一条链上的信息,使得研究人员对于亲本DNA模板链进行DNA测序,避免单细胞DNA扩增和测序时丢失定向信息
收样与样本制备过程中的注意事项
1. 样本类型:细胞(植物细胞需要制备成原生质体)、组织(一般需要鲜样不可冷冻)、血液2.最适上机检测浓度:7x105-1.2x106个/ml3.细胞活率:细胞活率大于70%4. 细胞大小:小于40μm5.细胞结团率:小于10%

  
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