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活细胞成像系统在实际应用上有哪些功能?

点击次数:64 发布时间:2020-09-15
  活细胞成像系统是用于活细胞长时间、高清晰度、高灵敏度成像的设备。当用活细胞染料标记细胞内特定生物大分子,或者使用荧光蛋白标记体内特定蛋白时,使用该荧光染料或者荧光分子特定的激发光线激发,通过探测其特用的发射光线即可探测到该生物大分子。活细胞成像系统一方面控制细胞生存的外部环境,提供合适的温度、适度和pH,让细胞处于好的状态。另外一方面通过高灵敏度CCD捕捉细胞中的微弱荧光,长时间观察细胞中的荧光分子的运动,具体揭示细胞间或细胞内生物大分子的变化过程。
 
  主要用途:
  针对活细胞在体外模拟体内环境的条件下,进行显微成像采集定时拍摄,在白光或荧光下观测活细胞的增殖细胞迁移粘附等等进行细胞分析成像;实现在细胞水平上的定性和定量分析、活细胞图像处理、活细胞动态示踪。在分子水平,可做到基因定位定量表达的动态分析、蛋白质合成降解运输和相互作用的动态研究、细胞骨架的代谢动力学测定和细胞周期各时相的动态观察等。
  活细胞成像系统的主要功能为:
  1、多维成像:目前可以做到六维成像。通过光学切片技术,实现对样品的3D观察,构建样品的立体结构。
  2、3D还原型反卷积处理:显微镜的分辨率和图像的对比度取决于物镜收集的光学信息。显微镜光路中衍射和折射现象的存在,使得样品信号的位置和强度都发生了变化,降低了系统的分辨率和图像的质量。API作为对图像数据进行反卷积处理最早的实践者,将显微镜的硬件设计和后期软件处理结合在一起,通过对光学信号的3D还原型反卷积处理,大大提高了显微镜的灵敏度和分辨率。
  3、延时摄影: 通过软件jing确的控制,拍摄的时间间隔从数秒到数小时不等,在长时间拍摄下也不会造成荧光信号的淬灭。根据实验需求的不同,无论单一层面还是三维结构,都可以获得良好的效果。
  4、高速离子成像:结合高速CCD和高效的光路,在512×512像素下仍然可以实现21帧/秒的成像速度。对于快速的离子浓度的变化,zui快可以50-100帧/秒的速度获取图像。
  5、荧光共定位分析:通过比较多个荧光通道的定位情况,即可知道他们在空间上和时间上的分布信息,进而得到相应的荧光信号是否存在相互作用、协同运动、定向运输等。
  6、荧光共振能量转移:DeltaVision特制的活细胞滤片组保证CFP/YFP,GFP/mCherry(RFP)荧光强度的jing确记录,并进一步计算出蛋白对之间jing确的能量转移系数。
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